細胞消化的方法有什么

　　在貼壁細胞傳代前必需將細胞與貼附介質(zhì)分離，常見的方式就是通過胰蛋白酶對細胞進行消化。那么你知道細胞消化的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧!

　　一、機械消化法

　　直接用液體吹打或用刮刀，施予外力讓細胞與培養(yǎng)底物分離；適用于貼壁性弱的細胞傳代，但相較于其它消化方法，這種外力無法量化控制，細胞分散效果差，且可能會造成大量細胞破損，使內(nèi)容物釋放到培養(yǎng)基，進而影響細胞傳代狀態(tài)。

　　二、離子螯合法

　　細胞膜表面蛋白大多需要鈣、鎂離子來維持與胞外基質(zhì)的穩(wěn)定鍵結(jié)，當然也包含各種黏附蛋白（例：整合素、鈣黏著蛋白、橋粒等），螯合劑會在不破壞細胞膜表面蛋白的狀況下，抽離這些離子，使黏附蛋白失活而減少細胞-細胞間及細胞-底物間的連接作用，讓細胞較容易在施予外力時，脫離培養(yǎng)底物并促進細胞分散。

　　0.02%EDTA是細胞傳代常用的離子螯合劑，在37℃作用效果佳（消化較敏感的細胞可在4℃作用），適用于消化一般貼壁性細胞或細胞表面標記實驗細胞。但EDTA無法用血清終止其反應(yīng)，所以在消化細胞后必須用緩沖鹽溶液（如：PBS）清洗離心，以免影響后續(xù)細胞貼盤效果。

　　三、酶消化法

　　用蛋白水解酶消化連接細胞及培養(yǎng)底物的蛋白質(zhì)，適用于消化貼壁性稍強的細胞。

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